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Toll樣受體8在人宮頸癌細胞株HeLa中的表達及其激動劑對HeLa細胞增殖和凋亡的影響

楊恒 何志強 趙銀霞 王楷文 鄭東 蘇兆亮 仝佳 馬潔 王勝軍 許化溪 江蘇大學檢驗醫學研究所免疫研究室 鎮江212013 河南省中醫院檢驗科
  • toll樣受體8
  • 宮頸腫瘤
  • hela細胞
  • 細胞增殖
  • 細胞凋亡

摘要:目的觀察Toll樣受體8(TLR8)在人宮頸癌細胞株HeLa中的表達,探討TLR8激動劑CL075對HeLa細胞增殖和凋亡的影響。方法采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)法,檢測13種腫瘤細胞系中TLR8mRNA和經CL075作用后HeLa細胞中環氧化酶2(COX-2)、Bcl-2和血管內皮生長因子(VEGF)mRNA的表達水平;采用免疫熒光技術對HeLa細胞中TLR8蛋白的表達進行定位觀察;采用流式細胞術檢測不同濃度CL075作用下HeLa細胞的細胞周期和凋亡的變化;采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測HeLa細胞的增殖狀態。結果與其他腫瘤細胞株相比,HeLa細胞中TLR8mRNA的表達水平最高,達703.7±20.6。TLR8蛋白主要定位于HeLa細胞的胞漿中。0.1、0.5和1.0μg/ml的CL075分別作用于HeLa細胞48h后,G2/M+s期細胞所占的比例逐漸增高,其中1.0μg/mlCL075作用組G2/M+S期細胞所占的比例最高,達(57.67±1.73)%,明顯高于空白對照組[(39.02±2.33)%,P〈0.01]。經不同濃度的CL075處理后,HeLa細胞的凋亡水平與空白對照組相比,無明顯改變(P〉0.05);但經順鉑處理后,凋亡細胞明顯增多(P〈0.01)。MTT法檢測結果顯示,與空白對照組比較,CL075作用于HeLa細胞48和72h后,HeLa細胞的增殖能力明顯增強(P〈0.01)。CIA)75作用于宮頸癌HeLa細胞24和48h后,COX-2、Bcl-2和VEGF mRNA的表達水平明顯升高(P〈0.05)。結論宮頸癌HeLa細胞中TLR8的表達水平及其與配體相互作用的信號,可能是腫瘤發生和發展的重要因素之一。TLR8可能是宮頸癌治療的一個潛在靶點。

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