摘要：目的檢測(cè)鸚鵡熱嗜衣原體（Chlamydophila psittaci，c加）蛋白酶樣活性因子（cMamydial protease-likeactivity factor，CPAF）免疫優(yōu)勢(shì)區(qū)基因在E．coli B121中高效表達(dá)的產(chǎn)物在印5感染診斷中的應(yīng)用，為建立印s感染的快速診斷奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法利用生物信息學(xué)軟件篩選出CpsCPAF免疫優(yōu)勢(shì)區(qū)基因序列（CPAFm，A196～A450），設(shè)計(jì)特異性引物，PCR擴(kuò)增目的基因，將其克隆入pGEX6p-2載體后轉(zhuǎn)化E．coliB121，利用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白，Westernblot鑒定重組蛋白。以純化的重組蛋白作為包被抗原，建立血清學(xué)診斷的間接ELISA法；同時(shí)用商品ELISA試劑盒與建立的間接ELISA法檢測(cè)180份可疑Cps感染的病鴨血清標(biāo)本，將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步用Westernblot方法驗(yàn)證。結(jié)果構(gòu)建原核重組質(zhì)粒pGEX6p-2／Cps CPAFm，表達(dá)相對(duì)分子質(zhì)量約為54×10^3的目的蛋白產(chǎn)物。以純化的重組蛋白為包被抗原建立間接ELISA法檢測(cè)Cps參考血清，其陰、陽(yáng)性符合率均為100％；與肺炎嗜衣原體（C．pneu-moniae，印n）、沙眼衣原體（C．trachomatis，Ct）無(wú)交叉反應(yīng)。對(duì)180份可疑病鴨血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，與商品Birds Chlamydia Psittaci IgG ELISA試劑盒比較，以Westernblot方法作對(duì)照，自建的ELISA法符合率均為100％，Birds Chlamydia Psittaci IgG ELISA Kit符合率為77．5％～95．0％。結(jié)論以Cps CPAF免疫優(yōu)勢(shì)區(qū)（A196～A450）作為診斷抗原，建立血清學(xué)診斷的間接ELISA法具有較好的臨床診斷價(jià)值。