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鴨抗病毒蛋白(viperin)在轉(zhuǎn)染的BHK-21細(xì)胞表達(dá)并抑制鴨坦布蘇病毒出芽

周祺; 顧香雪; 許澤軍; 黃榮; 殷冬冬; 薩達(dá)婭; 呂炫; 王桂軍 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院; 獸醫(yī)病理生物學(xué)與疫病防控安徽省重點實驗室; 安徽合肥230036
  • viperin蛋白
  • 質(zhì)譜分析法

摘要:目的探索鴨抗病毒白(viperin)對鴨坦布蘇病毒(DTMUV)增殖的影響。方法使用生物學(xué)信息學(xué)方法分析鴨viperin基因,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-6P-viperin和真核表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-N1-viperin,分別轉(zhuǎn)化Rosseta感受態(tài)細(xì)胞和轉(zhuǎn)染BHK-21細(xì)胞。用DTMUV分別感染真核表達(dá)質(zhì)粒和空載體質(zhì)粒的BHK-21細(xì)胞,利用實時熒光定量PCR檢測細(xì)胞沉淀和上清中DTMUV的含量,利用質(zhì)譜的方法鑒定增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)單克隆抗體捕獲的結(jié)合蛋白。結(jié)果鴨viperin基因與其他種屬viperin基因有顯著差異。鴨viperin蛋白能成功在BHK-21細(xì)胞表達(dá),鴨viperin抑制DTMUV在BHK-21細(xì)胞中的出芽。質(zhì)譜分析結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染真核表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞中可能存在6種影響抑制DTMUV增殖、出芽的蛋白。結(jié)論鴨viperin蛋白可在BHK-21細(xì)胞表達(dá),且能抑制鴨坦布蘇病毒出芽。

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細(xì)胞與分子免疫學(xué)

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