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胰島素樣生長因子-1(IGF-1)對小鼠卵丘細胞自噬與胞吞相關因子表達的影響

馬睿; 潘陽陽; 王萌; 李秦; 何翃閎; 胡學權; 趙凌; 王靖雷; 崔燕; 余四九 甘肅農業大學動物醫學院/甘肅省牛羊胚胎工程技術研究中心; 蘭州730070
  • 自噬
  • 胞吞
  • 卵丘細胞

摘要:卵丘細胞的質量對卵母細胞的生長發育至關重要,其自噬和胞吞可調控細胞生長及營養運輸,以應對惡劣環境對卵母細胞質量的威脅.從促排處理的小鼠輸卵管膨大部收集卵丘—卵母細胞復合體(Cumulus oocyte complexes,COCs),分離卵丘細胞進行體外培養,并添加0、50、100、150和200 ng/mL IGF-1處理細胞,分別提取細胞總RNA和總蛋白,實時熒光定量PCR檢測各處理組Atg5、Beclin1、LC3、Cav1和Cav2 mRNA的相對表達水平.免疫熒光定位不同蛋白在細胞中的表達,并結合蛋白免疫印跡(Western-blot,WB)測定不同質量濃度IGF-1處理組Atg5、Beclin1、LC3、Cav1和Cav2的蛋白表達水平,分析IGF-1對卵丘細胞自噬和胞吞的影響.結果顯示:正常培養的卵丘細胞均可表達Atg5、Beclin1、LC3、Cav1、Cav2 mRNA和蛋白,蛋白主要定位在細胞質.IGF-1可調控小鼠卵丘細胞Atg5、Beclin1、LC3、Cav1和Cav2蛋白的表達,與對照組相比,各處理組的Atg5蛋白表達量均升高;Beclin1和LC3蛋白表達量顯著降低,且在100 ng/mL IGF-1處理組中最低.Cav1和Cav2蛋白在50 ng/mL和200 ng/mL處理組的表達量均顯著降低,但在該質量濃度變化范圍內,隨著IGF-1質量濃度增大,2種蛋白的表達量不是線性降低,而是在100 ng/mL和150 ng/mL處理組表達量有回升現象.表明IGF-1可調控小鼠卵丘細胞的自噬和胞吞相關因子的表達,調控效果與IGF-1的質量濃度有關.

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西北農業學報

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