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兩種聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中的應(yīng)用比較

陳載鑫; 何丹; 謝嶺平; 李柳燕; 許紅麗; 方佩榮; 尹沃河; 付文金 廣東醫(yī)科大學(xué)附屬東莞市厚街醫(yī)院檢驗科; 廣東東莞523900; 武崗市人民醫(yī)院; 湖南武崗422400
  • 聚合酶
  • 基因多態(tài)性
  • snp
  • 等位基因特異性引物延伸法

摘要:目的比較TaqTMHotStarDNA聚合酶和TspTMPlatinum DNA聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中的應(yīng)用效果。方法取120例抗血栓治療患者全血進行DNA提取、多重PCR擴增,將產(chǎn)物分2份,1份用TaqTMHotStarDNA聚合酶進行等位基因特異性引物延伸,1份用TspTMPlatinum DNA聚合酶進行等位基因特異性引物延伸,然后進行雜交反應(yīng),用Luminex 200系統(tǒng)檢測CYP2C19基因多態(tài)性,同時將所有樣本送第三方進行基因測序。結(jié)果TaqTMHotStarDNA聚合酶組檢測結(jié)果與測序結(jié)果完全一致,TspTMPlatinum DNA聚合酶則會出現(xiàn)一些偏差,說明TaqTMHotStarDNA聚合酶參與的檢測結(jié)果分辨率明顯高于TspTMPlatinum DNA聚合酶參與的檢測結(jié)果。結(jié)論兩種聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中均可以取得一定的檢測結(jié)果,但是為了結(jié)果的可靠性建議在檢測過程中使用TaqTMHotStarDNA聚合酶。

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