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Forskolin引起大鼠脂肪細胞內脂滴重塑

劉梅芳; 杜從闊; 蘇雪瑩 濟寧醫學院藥學院; 日照276826; 北京大學基礎醫學院生理與病理生理學系; 北京100191
  • forskolin
  • 脂肪細胞
  • 脂滴
  • perilipin家族蛋白

摘要:脂肪組織是人體的主要能量儲庫,甘油三酯貯存在細胞內脂滴(lipid droplets, LDs)中,越來越多的研究表明脂滴是細胞內代謝活躍的細胞器。本研究旨在探討forskolin長時間刺激脂肪分解過程中脂滴形態和脂滴表面perilipin家族蛋白的改變。以Sprague-Dawley (SD)大鼠附睪脂肪墊來源的分化脂肪細胞為研究對象,給予1μmol/L forskolin慢性刺激24 h,采用比色方法測定培養基中甘油的濃度;采用尼羅紅染色觀察細胞內脂滴形態的變化;采用熒光定量PCR檢測perilipin家族蛋白mRNA水平的改變;采用免疫印跡和免疫熒光染色觀察蛋白水平以及蛋白的亞細胞定位。結果表明,1μmol/L forskolin孵育24 h可以持續刺激脂肪分解。伴隨著脂肪分解的進行,細胞內脂滴形態逐漸發生改變,細胞內聚集存在的大脂滴逐漸減少,位于細胞周邊的小脂滴逐漸增加,最終細胞內大脂滴全部消失,取而代之的是在細胞質中彌散存在的微小脂滴。在脂肪分解過程中,perilipin家族蛋白水平也發生明顯變化。分化成熟的脂肪細胞幾乎沒有Plin2蛋白表達,而forskolin慢性刺激可以顯著增加Plin2蛋白以及mRNA的水平,增加的Plin2蛋白特異性結合在脂滴表面。Forskolin慢性刺激對Plin3的mRNA水平無顯著影響,但可以顯著降低Plin1、Plin4和Plin5的mRNA水平。以上結果提示,在forskolin慢性持續刺激脂肪分解過程中,脂滴形態和perilipin家族蛋白均發生顯著改變。

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