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廣西眼鏡蛇毒細胞毒素-2的分離純化及其對大鼠肝星狀細胞HSC-T6的作用

王秀男; 張學榮; 廖明; 班建東; 農君; 陶慧娟; 陳榮芳 廣西醫科大學基礎醫學院; 廣西南寧530021; 廣西醫科大學生命科學研究院; 廣西南寧530021
  • 肝纖維化
  • 眼鏡蛇毒
  • 分離純化
  • 肝星狀細胞

摘要:目的通過層析法從廣西眼鏡蛇毒中分離得到電泳純的細胞毒素-2(CTX-2),探索CTX-2對大鼠肝星狀細胞(HSC-T6)的增殖抑制作用。方法采用DEAE-Sepharose CL-6B陰離子交換層析、Spehadex G-50凝膠層析和Macro-prep High S陽離子交換層析結合的方法分離眼鏡蛇毒粗毒;經SDS-PAGE電泳鑒定蛋白純度;NanoLC-ESI-MS/MS質譜方法鑒定其組分并測定分子量;CCK-8法檢測CTX-2對HSC-T6的增殖抑制作用,確定其最小有效濃度。結果眼鏡蛇毒粗毒經分離純化獲得電泳純的CTX-2,其分子量約為9.548 kD;不同濃度CTX-2作用于HSC-T6細胞24 h后,其增殖抑制作用隨濃度增加而增大,呈量效關系,抑制增殖的最小有效濃度為8 mg/L, IC 50 為11.52 mg/L。結論廣西眼鏡蛇毒粗毒經三步分離法得到電泳純且具有高生物活性的CTX-2;廣西眼鏡蛇毒CTX-2可抑制HSC-T6細胞增殖,抑制作用呈量效關系。

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蛇志

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