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長鏈非編碼RNA-GAS5慢病毒表達載體構建及其轉染效率鑒定

鄭東穎; 侯悅; 李媛媛; 楊云; 喬寵 大連醫科大學附屬第二醫院婦產科; 遼寧大連116000; 中國醫科大學附屬盛京醫院婦產科; 遼寧沈陽110000
  • 長鏈非編碼rna
  • 滋養細胞
  • 慢病毒載體

摘要:目的構建長鏈非編碼RNA-GAS5(lncRNA-GAS5)過表達及干擾慢病毒載體,并在人滋養細胞中進行轉染效率鑒定。方法獲取lncRNA-GAS5基因序列,合成重組lncRNA-GAS5全基因序列,同時設計并合成3條lncRNA-GAS5 RNAi序列,構建過表達及干擾慢病毒載體,轉染至293T細胞包裝病毒并測定其滴度,轉染人滋養細胞株HTR-8/SVneo后,使用熒光顯微鏡觀察熒光表達情況,采用實時定量聚合酶鏈式反應法檢測lncRNA-GAS5表達,并篩選出最佳干擾效率的表達載體。結果過表達載體感染細胞后,其表達量提高了2.12倍;干擾載體感染細胞后,其表達量降低了67.3%。結論本實驗成功構建了lncRNA-GAS5慢病毒過表達和干擾載體,可為后續進一步研究提供基礎。

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臨床軍醫

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