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花生瘡痂病菌ISSR-PCR反應(yīng)體系的建立和優(yōu)化

李元杰; 劉璐; 周如軍; 趙杰鋒; 付祎瑋; 傅俊范 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院; 沈陽(yáng)110866
  • 花生瘡痂病
  • arachidis

摘要:建立和優(yōu)化了花生瘡痂病菌ISSR-PCR反應(yīng)體系,為研究花生瘡痂病菌遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)提供理論基礎(chǔ)。采用正交試驗(yàn)和細(xì)調(diào)性單因素試驗(yàn)對(duì)模板DNA用量、最適引物、引物濃度、Mg2+濃度、Taq酶濃度、d NTPs濃度以及退火溫度等影響ISSR反應(yīng)結(jié)果的各因素進(jìn)行了研究。最優(yōu)體系中各成分濃度分別為Mg2+ 2. 0 mmol/L,dNTPs 0. 2 mmol/L,Taq酶1. 5 U,引物0. 88μmol/L,模板DNA 30~40 ng/25μL;篩選出8條適用于花生瘡痂病菌遺傳多樣性分析的ISSR引物。

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吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)

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