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表達甲型H1N1流感病毒血凝素抗原的DNA疫苗構建及其免疫原性評價

黃楊 王鳳 王倩 陳家麗 仇超 徐建青 唯可達生物科技有限公司 蘇州215125 復旦大學生物醫學研究院 上海200032 (復旦大學附屬)公共衛生臨床中心科學研究部 上海市201508
  • 流感病毒a型
  • hin1亞型
  • 疫苗
  • dna
  • 血凝素類

摘要:目的構建表達甲型HIN1流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)抗原的DNA疫苗,并在小鼠中測試其免疫原性。方法運用人密碼子優化技術合成甲型HIN1流感病毒HA序列,并轉移至DNA疫苗載體,用Westernblotting檢測其表達效率。采用單純隨機抽樣方法把BALB/c小鼠分成DNA疫苗組和對照組。用DNA疫苗免疫疫苗組小鼠,免疫后取小鼠血清和脾細胞,分別用ELISA方法和酶聯免疫斑點試驗(ELISPOT)方法檢測血清中的特異性抗體應答和脾細胞中的特異性T細胞應答,最后用血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)試驗和假病毒中和試驗分別檢測血清中的HI抗體和中和抗體應答。采用t檢驗作兩組之間比較。結果所構建的DNA疫苗能夠高效表達HA蛋白。免疫小鼠后能有效誘導T細胞免疫應答[429.0±113.4斑點形成細胞(spot—forming cell,SFC)/10。脾細胞],血清結合抗體滴度為16127.0±2698.0,HI抗體滴度為100.8±16.9,所有數據均顯著高于載體對照(分別為t=3.863,P=0.0042;t=5.734,P=0.0002;t=6.018,P=0.0001)。DNA疫苗能活化產生高水平的針對同源H1N1毒株的中和抗體,但不能活化產生針對異源H1N1毒株的中和抗體。結論本研究構建的DNA疫苗有較好的免疫原性,并能誘導一定水平的保護性抗體產生。

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國際生物制品學

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