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基于核酸適配體/苝酰亞胺的非標記熒光技術檢測甲基苯丙胺

張天源; 郝紅霞; 楊瑞琴 中國人民公安大學刑事科學技術學院; 北京100038; 證據科學教育部重點實驗室(中國政法大學); 2011司法文明協同創新中心; 北京100088
  • 核酸適配體
  • 水溶性苝酰亞胺衍生物
  • 甲基苯丙胺

摘要:運用能特異性識別甲基苯丙胺的核酸適配體作為識別元件,通過合成水溶性苝酰亞胺衍生物(PBIs)作為熒光探針,構建了一種非標記的適配體熒光檢測方法,用于高靈敏度、高選擇性檢測甲基苯丙胺。當沒有靶標甲基苯丙胺時,Exo I將卷曲的適配體降解成寡核苷酸片段,探針PBIs不發生聚集,體系熒光信號基本不變;當甲基苯丙胺存在時,與適配體結合形成穩定結構,從而抵抗了Exo I的降解作用,帶負電的適配體/甲基苯丙胺復合物使探針PBIs發生聚集,由于聚集誘導猝滅效應,體系熒光強度驟降。基于以上原理,實現了甲基苯丙胺的高靈敏度、選擇性檢測。探針PBIs濃度為5μmol/L、適配體濃度0. 8μmol/L、Exo I酶切時間40 min為檢測甲基苯丙胺的最佳條件,該方法的檢出限為436. 7 nmol/L。

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