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牛諾如病毒和冠狀病毒雙重PCR檢測方法的建立及初步應用

王文佳; 師志海; 蘭亞莉; 徐照學 河南牧業經濟學院制藥工程學院; 河南鄭州450046; 河南省農業科學院畜牧獸醫研究所; 河南鄭州450002; 河南省畜禽繁育與營養調控重點實驗室; 河南鄭州450002
  • 牛諾如病毒
  • 牛冠狀病毒
  • 犢牛腹瀉
  • 雙重聚合酶鏈反應

摘要:為建立能同時檢測牛諾如病毒(BNoV)和牛冠狀病毒(BCoV)的聚合酶鏈反應(PCR)檢測方法,根據BNoV和BCoV基因組的保守區域設計2對特異性引物,預期特異性擴增BNoV和BCoV的片段大小分別為542 bp和896 bp。特異性檢測結果顯示,該方法能特異性擴增BNoV和BCoV的目的條帶,未擴增出其他犢牛腹瀉病毒性病原;BNoV和BCoV的最低檢測限分別為6.71×10^4 copies/μL和1.38×10^5 copies/μL。對采集自河南地區的127份犢牛腹瀉樣品的檢測結果顯示,BNoV的陽性率為6.30%(8/127),BCoV的陽性率為14.96%(19/127),與單項PCR檢測結果相一致。結果表明,建立的雙重PCR方法可用于BNoV和BCoV的檢測及流行病學調查。

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動物醫學進展

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