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雞細(xì)小病毒和雞新城疫病毒雙重PCR檢測(cè)方法的建立

奉彬; 謝芝勛; 鄧顯文; 張艷芳; 謝麗基; 謝志勤; 范晴; 曾婷婷; 羅思思; 黃嬌玲; 王盛; 劉加波 廣西桂林市臨桂區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心; 廣西臨桂541199; 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所/廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 廣西南寧530001
  • 雞細(xì)小病毒
  • 雞新城疫病毒
  • 雙重pcr
  • 特異性
  • 敏感性

摘要:旨在建立雞細(xì)小病毒(ChPV)與雞新城疫病毒(NDV)雙重PCR檢測(cè)方法,參考ChPV NS1基因和NDV F基因的保守區(qū)域,設(shè)計(jì)篩選、合成驗(yàn)證兩對(duì)ChPV和NDV特異性引物,通過(guò)優(yōu)化其反應(yīng)體系,以及雙重PCR的特異性、敏感性試驗(yàn)來(lái)評(píng)估建立的ChPV與NDV雙重PCR檢測(cè)方法。結(jié)果表明,建立的雙重PCR同時(shí)擴(kuò)增出687 bp ChPV和453 bp NDV片段,對(duì)ChPV與NDV的敏感性分別達(dá)到64 fg和25 fg,但對(duì)其他對(duì)照組病原體均無(wú)擴(kuò)增,對(duì)ChPV與NDV混合感染的臨床病料的檢測(cè)結(jié)果與各病毒單項(xiàng)PCR檢測(cè)結(jié)果相符。說(shuō)明建立的ChPV與NDV雙重PCR檢測(cè)方法可用于臨床上兩種病毒混合感染的快速診斷。

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