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基于石榴全基因組序列的SSR標記開發及鑒定

洪文娟; 郝兆祥; 劉康佳; 羅華; 畢潤霞; 苑兆和; 宗世祥; 王君 北京林業大學林木育種國家工程實驗室林木花卉遺傳育種教育部重點實驗室; 北京100083; 北京林業大學林學院; 北京100083; 棗莊市石榴研究中心; 山東棗莊277300; 南京林業大學林學院; 江蘇南京210037; 北京林業大學生物科學與技術學院; 北京100083
  • 石榴
  • 基因組
  • ssr
  • 標記開發
  • 多態性

摘要:【目的】利用cDNA文庫篩選的石榴SSR多態性標記數量有限,為進一步推動石榴遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構建、品種鑒定等研究,有必要系統開發高效穩定的分子標記位點。【方法】本研究根據已發表的石榴基因組測序數據利用MISA軟件對1~6核苷酸重復的SSR位點進行了查找,分析了不同類型SSR位點的序列特征,進而設計引物并檢測了引物的有效性和多態性。【結果】(1)石榴基因組中共檢測到146 445個SSR位點,其中以單核苷酸重復型SSR最多(占51.95%),六核苷酸重復型最少(僅占0.38%);SSR序列以A/T堿基占主導,具有偏向性。(2)石榴基因組SSR序列長度變化范圍為10~252 bp,平均長度15.48 bp。不同長度重復單元類型的SSR序列長度存在豐富變異,呈現隨著重復次數增多,SSR序列豐度減少的趨勢。(3)根據不同類型SSR位點設計并合成引物140對,其中119對在12份石榴種質中可擴增出有效條帶,41對可產生多態性條帶,PIC值在0.007~0.566之間;從中篩選出多態性較高、穩定性好的引物15對,共檢測到等位基因44個,平均每個SSR位點檢測到2.933 3個等位基因。【結論】利用石榴全基因組序列可實現SSR標記的大規模開發,并可鑒定出大量適用于石榴遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構建、品種鑒定等研究的SSR引物。相關研究為石榴的遺傳育種研究提供了豐富的SSR序列信息和標記資源。

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